Recherche chaud: comment faire four avec baril diorama 2 guerre mondiale comment sentir la vie sourd mirtazapine chat effets secondaires comment ecrire des punchline article sur la premiere impression modifire moteur essence en gaz C0sta Crucero dubai
Index Loisirs Santé Technologie

Comment faire une culture de tissus

Publié:2012-07-27Source: général
Advertisement

Sept méthodes: stériliser vos zone de travail thoroughlyChoose la culture mediaPrepare la culture mediaSecure le tissu samplePrepare l'cultureFeed l'cellsFollow la croissance et la morphologie (signes de changement) des cellules

Tissu fait référence à un ensemble de cellules ayant des caractéristiques similaires. Ces cellules vivent dans des organismes, tels que les personnes, les plantes et les animaux. Une culture de tissus se réfère à la croissance délibérée de tissus et / ou cellules séparées de l'organisme donneur. Les cellules de tissus sont prélevés à partir de l'organisme d'origine et sont cultivées dans des conditions stériles et contrôlées dans un laboratoire. On observe la croissance et le comportement des cellules, étudié, et / ou modifiés dans la culture. Les scientifiques étudient les cellules dans un liquide ou un milieu de culture semi-liquide dans un effort pour identifier leur fonctionnement, modifier leur maquillage, ou canaliser leur croissance vers un résultat défini. Les cultures sont étudiés pour voir comment les cellules se développent dans des environnements différents. Le plan peut être de promouvoir la croissance; par exemple, la croissance dans les tissus végétaux peut conduire à des plantes plus grandes et plus productives. Un autre plan pourrait être de déterminer ce qui empêche la croissance, peut-être, pour enrayer une maladie. Alors que les médias et les conditions peuvent varier d'un type de cellule à cellule de type, le processus de base reste le même. Faire une culture de tissu est chronophage, exigeant et minutieux travail. Ce qui suit va vous montrer comment faire une culture de tissu.

Étapes

Méthode 1 de 7: Stériliser votre zone de travail en profondeur

1

Stériliser la hotte laminaire et la zone autour d'elle.

Essuyez la zone de travail généreusement et soigneusement avec un chiffon humidifié avec de l'éthanol.

2

Utiliser uniquement des outils et du matériel stérile pour les cultures cellulaires.

3

Ouvrez tous les récipients de culture, tubes à essai, etc. à l'intérieur de la hotte à flux laminaire.

Jeter immédiatement de matériaux contaminés, tels que ceux ouverts à l'extérieur de la hotte laminaire, conformément aux règles des matières dangereuses.

4

Vaporiser tout avec de l'éthanol - à l'exception des cultures de tissus eux-mêmes et l'équipement utilisé pour les déplacer ou les nourrir.

5

Nettoyez vos mains gantées soigneusement avec de l'éthanol après le nettoyage de l'équipement et de le placer dans la hotte.

6

Suivre les protocoles pour l'élimination des déchets.

Méthode 2 de 7: Choisissez les milieux de culture

1

Choisir des médias adaptés à la lignée cellulaire (par exemple, végétale ou animale) et à l'esprit de la culture (par exemple, la croissance, le contrôle, ou de changement).

Il ya des milliers de médias à choisir, afin de confirmer que les médias sélectionnés est approprié à l'épreuve.

2

Utilisez uniquement des supports qui ont été précédemment testé la stérilité.

Méthode 3 de 7: Préparer les milieux de culture

1

Préparer les médias et effectuer d'autres travaux de culture de cellules à l'intérieur de la hotte à flux laminaire.

2

Préparer les médias soigneusement comme indiqué par le fournisseur ou par le protocole de laboratoire.

Méthode 4 de 7: Fixer l'échantillon de tissu

1

Grattez ou un tampon de cellules organisme hôte - personne, plantes, animaux, etc.

Cela peut être plus ou moins invasive par voie chirurgicale, en fonction de l'emplacement du tissu dans le corps.

Des échantillons de tissus peuvent être garantis par raclage ou de sectionnement des cellules de plantes en fonction du but.

Méthode 5 de 7: Préparer la culture

1

Effectuer toutes les fonctions sous une hotte laminaire.

2

Ajouter le moyen et l'échantillon de tissu dans leur récipient.

3

Cap ou le couvercle du conteneur parfaitement.

4

Activité record tel que requis par le protocole de laboratoire.

5

Rangez la culture comme dirigé.

Méthode 6 de 7: Nourrir les cellules

1

Reconstituer la solution des médias tous les 2-3 jours, ou les cellules peuvent mourir de manque de nutrition.

2

Médias chaudes à 37 degrés Celsius ou 95 degrés Fahrenheit avant de l'utiliser.

Utiliser les médias préchauffées et ne pas garder les cellules de leur incubateur pour plus de temps que nécessaire.

3

Utilisez un T-ballon à décanter ancien milieu et versez dans la nouvelle.

4

Agiter T-ballon légèrement pour voir si les cellules sont en bonne santé ou l'agrégation, un signe qu'ils ne sont pas en bonne santé.

5

Procéder à les nourrir en ajoutant du milieu frais si les cellules semblent en bonne santé.

6

Retour de la culture à l'incubateur ou un réfrigérateur selon le protocole pour la lignée cellulaire particulière.

Méthode 7 sur 7: suivre la croissance et de la morphologie (signes de changement) des cellules

1

Examiner les cultures de tissus chaque jour.

Regardez pour la croissance, notez un changement dans la couleur, et / ou d'enregistrer tout changement dans le nombre de cellules.

2

Voir les cellules au microscope.

Les cellules vivantes semblent être assez lumineux tandis que les cellules malsaines seront terne.

Les cellules en suspension, telles que les cellules de sang, vont apparaître lisse et régulière.

Les cellules adhérentes, telles que celles provenant d'une usine raclée, joindre ensemble en masses.

Conseils

Pratiquez maintenir la stérilité avec vos cultures de tissus moins importants, car de petites quantités de contaminants peuvent ruiner votre stock de cellules.

Gardez un "journal de tissu;" enregistrer le type de cellule, le make-up du milieu, les dates auxquelles les cellules ont été traitées, et des observations sur la culture.

Avertissements

Soyez prudent de ne pas contaminer la culture de tissus avec des bactéries ou d'autres sources de cellules.

Autoriser ne pas manger, boire ou fumer dans ou près de la zone de travail.

Traiter toutes les cultures de tissus comme si elles sont des déchets dangereux, car ils peuvent porter des souches virales.

Choses que vous devez

Croissance des médias sont des solutions qui pourraient contenir (1) des ions en vrac; (2) les oligo-éléments: (3) de glucose; (4) les acides aminés: (5) vitamines; et / ou (6) de sérum de promouvoir les activités de croissance.

Contenants des médias, des boîtes de Pétri, des lames de microscope, des flacons T, et d'autres appareils de laboratoire utilisés pour mesurer, d'ajouter ou de fluides de transport

Laminaire hotte à flux vertical

Éthanol

L'équipement de sécurité, y compris des gants, des lunettes et masque

Microscope à contraste de phase inversée

[Rédacteur: Admin]
Je vous imagine comme

Articles recommandés

Cliquez Top Ranking